Široka je oblast delovanja ove ustanove: od arheološkog i konzervatorskog posla do etnografske, istorijske, spomeničke i drugih delatnosti.

U muzeju posetiocima su na raspolaganju dve stalne muzejske postavke: jedna o ustanku u ratnoj 1941. godini i stvaranju Užičke republike, a druga o zavičajnoj prošlosti od najstarijeg do današnjeg doba.

Tu je i umetnički legat, posvećen delu prvog užičkog akademskog slikara Mihaila Milovanovića. Za vreme rata u zdanjima sadašnjeg muzeja radio je partizanski Vrhovni štab, a u obližnjem podzemnom prostoru nalazila se partizanska fabrika oružja i municije.